NAD⁺, nikotinamidadenindinukleotid, är ett koenzym som deltar i flertalet organismers ämnesomsättning. NAD⁺ och dess fosforylerade och reducerade former NADP⁺, NADH och NADPH har centrala roller inom cellernas metabolism och energiproduktion. De förmedlar överföring av två väteatomer mellan molekyler vid oxidations- och reduktionsprocesser i bland annat citronsyracykeln och glykolysen.^[1] Koenzymet är en dinukleotid då det består av två nukleotider som förenats genom deras respektive fosfatgrupper.

I de flesta organismer kan NAD⁺ tillverkas av enkla byggstenar (de novo) från aminosyrorna tryptofan och asparaginsyra. Ett annat sätt är att mer komplexa komponenter till koenzymet tas upp från födan i form av vitaminet niacin. Dessa komponenter genomgår sedan en räddningsaktion där de återvinns till sin aktiva form.

Nikotinamidadenindinukleotid, NAD⁺ består, i likhet med alla andra dinukleotider, av två nukleosider sammanbundna av två fosfatgrupper. Dessa nukleosider innehåller en ribosring vardera, den ena med kvävebasen adenin bunden till den första kolatomen och den andra med nikotinamid på samma position. Nikotinamidenheten kan bindas till denna anomeriska kolatom på två sätt. Detta ger upphov till två skilda strukturformer och NAD⁺ finns därmed som två diastereomerer. I levande organismer förekommer dock endast ß-nikotinamidformen av NAD⁺. Denna nukleotid sammanlänkas genom två fosfatgrupper som binder till den femte kolatomen.^[2]

Inom metabolismen accepterar eller donerar koenzymet elektroner i en redoxreaktion.^[3] Dessa reaktioner (sammanfattade i reaktionsformeln nedan) innefattar ett avgivande av två väteatomer från reaktanten (R) i form av en hydridjon (H^-) samt en proton (H⁺). Protonen släpps ut i en lösning medan reduktionsmedlet RH₂ oxideras och NAD⁺ reduceras till NADH via överföring av hydriden till nikotinamidringen.

RH₂ + NAD⁺ → NADH + H⁺ + R

Den ena elektronen i hydridelektronparet överförs till det positivt laddade kvävet i nikotinamidringen i NAD⁺ och väteatomen som blir över överförs till kolatomen på motsatt sida av kvävet (C4). Elektrodpotentialen i NAD⁺/NADH redoxparet är -0,32 volt. Detta gör NADH till ett starkt reduktionsmedel.^[4] Reaktionen kan också lätt gå i båda riktningar eftersom NADH oxideras tillbaka till NAD⁺ när det reducerar en annan molekyl. Detta betyder att koenzymet ständigt kan byta identitet mellan NAD⁺ och NADH utan att själv konsumeras.^[5]

I en råttlever är den totala mängden NAD⁺ och NADH ungefär 1 µmol per gram våt vikt. Detta är ungefär 10 gånger så höga värden som koncentrationen av NADP⁺ och NADPH i samma celler.^[6] Den faktiska koncentrationen av NAD⁺ i cellernas cytosol är svårare att mäta men uppskattningar visar på ett värde kring 0,3 mM. Jäst innehåller betydligt högre halter av NAD⁺, uppskattningsvis så mycket som 1,0-2,0 mM.^[7]

Förhållandet mellan den oxiderade och den reducerade formen av NAD⁺ kallas NAD⁺/NADH-kvoten. Denna kvot spelar en viktig roll i den så kallade redoxstatusen i en cell. Redoxstatusen hos en cell indikerar både metabolisk aktivitet och hälsan hos cellerna.^[8] Effekterna av redoxstatusen är komplexa. Den kontrollerar till exempel aktiviteten av ett antal viktiga enzymer, så som glyceraldehyd-3-fosfatdehydrogenas och pyruvatdehydrogenas. I friska däggdjursvävnader ligger uppskattningar av kvoten mellan fritt NAD⁺ och NADH i cytoplasman oftast kring 700 vilket innebär att det finns 700 gånger så mycket fritt NAD⁺ som fritt NADH.^[9] Den totala kvoten mellan NAD⁺ och NADH är dock mycket lägre. Här ligger uppskattningarna oftast kring 3-10 i däggdjur.^[10]

NAD⁺ har flera viktiga roller i metabolismen. Det agerar som ett koenzym i redoxreaktioner, som donator av ADP-ribos i ADP-ribosylationreaktioner, ingår i second messenger-molekylen cyclic ADP-ribose och agerar som ett substrat bakteriellt DNA-ligas och enzymgruppen sirtuiner som använder NAD⁺ för att avlägsna acetylgrupper från proteiner. Utöver dessa metalliska funktioner uppstår NAD⁺ som en adeninnukleotid som kan släppas ut från celler både spontant och av reglerade mekanismer.^[11] NAD⁺ kan därmed också ha viktiga extracellulära användningsområden.

Den största rollen hos NAD⁺ inom metabolismen är att överföra elektroner från en molekyl till en annan. Reaktioner av denna typ blir katalyserade av en stor grupp enzymer, så kallade oxidoreduktaser. Det korrekta namnet på dessa enzymer innehåller namnet på båda deras substrater. Till exempel katalyserar NADH-ubiquinonoxidoreduktas oxidationen av NADH med koenzym Q.^[12] Hur som helst blir enzymerna även refererade till som dehydrogenaser eller reduktaser. NADH-ubiquinonoxidoreduktas blir oftast refererad till som NADH dehydrogenas eller ibland koenzym Q-reduktas.^[13]

När NAD⁺ respektive NADH är bundet till ett protein hålls de vanligtvis inom ett strukturmotiv känt som (på engelska) ”the Rossmann fold".^[14] Motivet är uppkallat efter Michael Rossmann som var den första forskaren att upptäcka hur vanlig denna struktur är inom nukleotidbindande proteiner.^[15] Strukturen innehåller tre eller fler parallella betaflak sammanlänkade med två alfahelixar i ordningen beta-alfa-beta-alfa-beta. Detta bildar ett betaflak omgett av ett lager alfahelixar på varje sida. Eftersom varje motiv binder till en nukleotid består varje bindande domän av NAD⁺ av två ihopparade motiv som båda binder till en av de två nukleotiderna av kofaktorn.^[15] Dock är detta strukturmotiv inte universellt bland enzymer som är beroende av NAD⁺ då en grupp bakteriella enzymer, involverade i aminosyrornas metabolism, som på senare tid upptäckts binder till koenzymet men saknar motivet.^[16]

Redoxreaktionerna som katalyseras av oxidoreduktaserna är mycket viktiga inom alla delar av metabolismen men ett speciellt viktigt område där sådana reaktioner sker är i frisläppandet av energi från näringsämnen. Här oxideras reducerade föreningar så som glukos och fettsyror och energi frigörs. Energin överförs sedan till NAD⁺ genom reduktion till NADH som en del av fettsyracykeln, glykolysen och citronsyracykeln. I eukaryoter överförs elektronerna som bärs av NADH till mitokondriernas inre matrix genom mitokondriens skyttlar så som till exempel malat-aspartatskytteln.^[17] Dessa skyttelsystem har samma transportfunktion även hos kloroplaster.^[18]

Eftersom både den oxiderade och den reducerade formen av nikotinamidadenindinukleotid används i dessa sammanlänkade reaktioner behåller cellen signifikanta koncentrationer av både NAD⁺ och NADH. Den höga NAD⁺/NADH-kvoten tillåter koenzymet att agera både som oxidations- och reduktionsmedel.^[19] I kontrast till detta är den huvudsakliga funktionen hos NADPH att fungera som reduktionsmedel inom anabolismen. Detta koenzym är involverat i bland annat fettsyrasyntesen och fotosyntesen. Eftersom NADPH behövs för att driva redoxreaktioner som ett starkt reduktionsmedel hålls NADP⁺/NADPH-kvoten väldigt låg.^[19]

• NADP
• FAD
• Cellandning
• Citronsyracykeln
• Glykolysen